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血凝抑制实验报告(通用20篇) 稿子汇 www.gaozihui.com
血凝抑制实验报告 篇1
禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。 稿子汇,范文学习文库
一、 血凝试验操作程序 稿子汇,范文学习文库
1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25 μL PBS液。 公文汇 www.gongwenhui.com
2、吸取25 μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25 μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25 μL。第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30 min观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)
二、血凝抑制试验操作程序
1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。(即1HAU抗原除以4)
2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25 μL PBS。
3、在第1孔加入25 μL被检血清,充分混匀后移出25 μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25 μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25 μL 4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30 min。
6、每孔加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25℃)静置40 min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。
7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2 log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。 将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。
三、试验过程中的注意事项
1样品的保存及试验前处理
1.1 采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。
1.2 一般情况下,在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏,否则低温冷冻保存。
1.3 在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。
1.4 对出现胶冻状的血清样品,可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其中少量的清亮血清。
1.5 水禽等样品为排除非特异性反应,还应相应进行灭能反应。具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。
2器材的选择
2.1 酶标板的选择:
建议使用96孔90°V型板进行试验,通过反复试验证明:90°V型板相对于110°板及130°板来讲,具有红细胞沉降速度快,产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。
2.2 移液枪的选择及使用:
①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程,以便精确度的提高。
②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。吸取液体时,枪头要深入液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时
应加在板孔底部。倍比稀释血清时,应每孔至少反复吹吸6次,以便混合均匀,还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样,以免交叉污染,影响试验结果。
③加样、倍比稀释时应高度集中注意力,以免漏加、重复加样等。
3试剂的保存及配置
3.1 禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置,试验前应提前将其恢复至室内温。抗原的保存温度为-20℃,反复冻融会降低抗原的滴度,应避免反复冻融。
3.2 PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备
①应尽量现用现配
②每次使用前应测PH值,以免时间过长而导致PH值发生改变。
③由于PH试纸跨度范围偏大,PH值不易准确介定,因此最好采用酸度计准确测量PH值,以提高试验的精确度。
④全部试验均采用同一种稀释液。
3.3 1%红细胞的制备
①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。
②采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中,因为通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比较,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱干净的目的。
③经20xx~3000r/min,5~10min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再加入十倍以上血量的PBS液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透明为止。
④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀,使其每孔加入相同数量的红细胞。
⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红,说明有溶血,不可再使用。
3.4抗原液的配制
①先做血凝试验测定效价,以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原,配制4HUA抗原应往前推算两孔,即除以4后的值。
②每次做试验前,必须重新检测禽流感抗原的血凝效价,以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确,从而导致试验结果不准确。
③为保证配制的抗原准确,还要进行抗原回滴试验。具体方法:做二排抗原回滴,在两排的第1~8孔各加25微升PBS,取4HAU抗原25微升加在两排的第1、第2孔,混匀,从第2孔倍比稀释至第4孔,弃去25微升,另一排同样。从第2至第8孔补25微升PBS,以保持75微升总量不变,另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞,震荡10秒钟。静置30分钟观察结果。这样在第1孔为4HAU抗原,第2孔为2HAU抗原,第3孔为1HAU抗原,第4孔为1/2HAU抗原,均为75微升总量,第5至第8孔为空白对照。如果抗原回滴试验不成立,应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。因为如果抗原浓度过高,则所测定的抗体效价水平偏低,如果抗原浓度过低,则所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至实验成立的话会对结果有很大影响。
4结果的判定
每次试验必须设阳性及阴性(空白)对照血清,判别试验是否成立。判读结果时,将酶标板倾斜45°,以孔底沉淀的红细胞流动性好,呈泪珠样流淌,边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。
5试验器具的清洗
每次试验完毕后,应将酶标板中液体甩净,然后用自来水反复冲净每个孔,再放入3%NaOH中4小时,清水反复冲净,再放入3%Hcl中4小时,清水反复冲净,再用蒸馏水反复冲洗几次,甩干水份,入干燥箱中干燥备用。实验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、干燥。以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。
四、小结
在进行禽流感血凝抑制试验时,应充分考虑到各方面的影响因素,提供的检测结果才会真实可靠,准确掌握禽类的免疫抗体水平,进而为科学防控禽流感提供理论依据。
血凝抑制实验报告 篇2
一、原理
流感病毒颗粒表面的血凝素(HA)蛋白,具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构,HA试验由此得名。HA蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰HA蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。
二、应用
该试验是目前WHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。可用于流感病毒分离株HA亚型的鉴定,也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。
三、缺点
只有当抗原和抗体HA亚型相一致时才能出现HI现象,各亚型间无明显交叉反应;除鸡血清以外,用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素;需要在每次试验时进行抗原标准化;需要正确判读的技能。
四、试验步骤
1 阿氏(Alsevers)液配制
称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g,加蒸馏水至100mL,散热溶解后调pH值至6.1,
69kPa 15min高压灭菌,4℃保存备用。(3.8%枸橼酸钠(3.8g枸橼酸钠,100ml超纯水),101 kPa,20min高压灭菌,4℃保存备用,保存期1个月)。
2 10%和1%鸡红细胞液的制备
2.1采血
用注射器吸取阿氏液约1mL(3.8%枸橼酸钠),取至少2只SPF鸡(如果没有SPF鸡,可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡),采血约2~4mL,与阿氏液混合(3.8%枸橼酸钠),放入装10mL阿氏液(生理盐水)的离心管中混匀。
2.2 洗涤鸡红细胞
将离心管中的血液经1500~1800 r/min 离心8分钟,弃上清液,沉淀物加入阿氏液(生理盐水),轻轻混合,再经1500~1800 r/min离心8分钟,用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜,再重复2次以上过程后,加入阿氏液20 mL(生理盐水),轻轻混合成红细胞悬液,4℃保存备用,不超过5天。
2.3 10%鸡红细胞悬液
取阿氏液保存不超过5天的红细胞,在锥形刻度离心管中离心1500~1800 r/min 8分钟,弃去上清液,准确观察刻度离心管中红细胞体积(mL),加入9倍体积(mL)的生理盐水,用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。(此步
可省略,直接配制1%红细胞)
2.4 1%鸡红细胞液
取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 mL,加入9 mL生理盐水,混合均匀即可。(根据检测血清的数量,估算一下需要的1%鸡红细胞量,可按0.3ml/每份血清)
3 抗原血凝效价测定(HA试验,微量法)
3.1 在微量反应板的1孔~12孔均加入25μl PBS(生理盐水),换滴头。
3.2吸取25μl抗原加入第l孔,混匀。
3.3从第1孔吸取25μl,病毒液加入第2孔,混匀后吸取25μl加入第3孔,如此进行倍比稀释至第11孔,从第11孔吸取25μl弃之,换滴头。
3.4每孔再加入25μl PBS(生理盐水)。
3.5每孔均加入25μl 体积分数为1%鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)。
3.6振荡混匀,在室温(20~25℃)下静置40min后观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下反应1小时)。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。
3.7结果判定 将板倾斜,观察血凝板,判读结果。
能使红细胞完全凝集(100%凝集,++++)的抗原最高稀释度为该抗原的血凝效价,此效价为1个血凝单位(HAU)。注意对照孔应呈现完全不凝集(-),否则此次检验无效。
4 血凝抑制(HI)试验(微量法)
4.1 根据3的试验结果配制4HAU的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点,终点稀释倍数除以4即为含4HAU的抗原的稀释倍数。例如,如果血凝的终点滴度为1:256,则4HAU抗原的稀释倍数应是1:64(256除以4)。
4.2 在微量反应板的1孔~11孔加入25μl PBS(生理盐水),第12孔加入50μl PBS(生理盐水)。
4.3 吸取25μl血清加入第1孔内,充分混匀后吸25μl于第2孔,依次倍比稀释至第10孔,从第10孔吸取25μl弃去。
4.4 1孔~11孔均加入含4HAU抗原25μl,室温(约20℃)静置至少30min。
4.5 每孔加入25μl 1%的鸡红细胞悬液混匀,轻轻混匀,静置约40min(室温约20℃,若环境温度太高可置4℃条件下进行),对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。
4.6 结果判定
试验成立的条件:只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2,阳性对照孔血清误差不超过1个滴度,试验结果才有效。
以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。
HI价小于或等于31og2判定HI试验阴性;HI价大于或等于41og2为阳性。
五、HI试验注意事项
1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对Re-4和Re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。
同一亚型的禽流感病毒制成的抗原,如果毒株来源不同,则可能会存在抗原性差异,从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲,疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时,则所测得的HI效价较高。
2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用,冻干的试剂应按照说明中规定的体积重新溶解并保存。要避免杂菌污染,因为污染所造成的非流感起源的凝集素也可与所有抗血清发生非特异反应。为避免反复冻融和细菌污染,可以无菌操作将试剂分装成小包装。
3、反应温度不能太高。若在37℃ (如温箱)下进行,
血凝抑制实验报告 篇3
随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高,人们普遍认识到实验室检测技术在临床应用的重要性。下面简单介绍一下鸡新城疫微量血凝试验和血凝抑制试验的注意事项及操作方法。
应用:
用于新城疫、产蛋下降综合征和传梁性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、疫苗免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等。
下面以新城疫病毒为例,介绍血凝和血凝抑制试验的方法:
注意事项:
一、样本要具有代表性:所采样本要能代表整体,通常采用四角加中间的随机取样法,并且确定适当的样品数量,一般1000只以下的鸡群采样率在2~5%;5000只以下1~2%;5000只以上0.5~1%。对产蛋期间的鸡群可采鸡蛋;对雏鸡或青年鸡,可采血。方法是:取青霉素小瓶,洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分,并注意不要用消毒剂,以免影响结果。每只鸡采血量在1ml左右,最好不低于1ml,在室温下静置至血清自然析出。
二、四单位抗原的准确性:要获得准确的监测效果,先做红血球的凝集试验,即测得抗原的血凝价,尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。
三、红血球洗脱的充分性:原则上,新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡,但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡,有时甚至是病鸡。因此,对红血球的洗脱的次数要多、要充分,并注意转速和时间,通常采用五次变速离心法:前四次为每分钟1500转,每次5分钟,最后一次为每分钟3000转,持续7~8分钟。另外,洗红血球过程中,应注意动作要轻,玻璃仪器之间尽量减少碰撞,以免造成红血球破裂而影响结果。
四、结果判定的及时性:检测中,每次试验均应设抗原与生理盐水对照,加入红血球后,每隔5分钟观察一次,一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时,应立即对样本进行结果判定,过早过晚都会影响判定结果的准确性。
血凝与血凝抑制试验的操作方法
一、材料与仪器:新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。
二、方法:
1%鸡红血球的制备:
1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉,采血,采血量视用量而定,5%抗凝剂与全血的比例为1∶3~4。
2.洗血球:共洗4~5次,每次5~8分钟,红血球与生理盐水的比例至少为1∶2~3。离心机转速为每分钟1500~3000转,最后倾去上清。
3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml,配成1%红血球备用。
三、血凝试验:
1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水,每孔0.05ml,吸等量新城疫抗原于第一孔内,混匀后吸出同量于第二孔内混匀,以此类推稀释至第11孔,并弃去0.05ml,留第12孔作为生理盐水对照,然后全部孔内加入1%鸡红血球。
2.将血凝板置于振荡器上振荡1~2分钟,使材料充分混均,放入恒温培养箱,每5分钟观察一次,至10~15分钟取出,一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。
3.结果判定:红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集(++++),在血凝板底部集为一小红点为沉淀(-),如底部为一小红点,四周为凝集的红细胞,则为不完全凝集(++)。
4.出现完全凝集的抗原的最高稀释度,即为该抗原的凝集价。
5.四单位抗原的制备:血凝试验的结果如为28(256),则前移2孔即26(64),作为四单位抗原的稀释度。即:63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。
四.血凝抑制试验:
1.血凝板上1~11孔全部加入0.05ml的生理盐水,于第一孔内加入等量的被检抗体,稀释至第10孔,弃去0.05ml,再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔,第11孔为抗原对照,12孔为生理盐水对照。在振荡器上振荡1~2分钟,放置室温约20分钟,然后加入等量的1%鸡红血球,振荡后放入恒温培养箱大约10~15分钟后进行结果判定。
2.结果:能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。
注:1、HI价在23~24时免疫可产生良好的免疫应答,如在疫区可提高到24~25免疫。
2、24~25 注:#为完全抑制,++为不完全抑制,-为不抑制。 实验一、首饰加工设备及工具的认识 一、实验目的: 1、认识首饰制作的基本设备。 2、认识常用首饰制作工具。 3、了解首饰加工材料。 二、实验要求: 1、通过对首饰加工工具、设备的观察,初步了解首饰加工制作的工艺特点。 2、初步了解首饰制作及生产环境。 三、实验内容:(以下内容手写,可适当删减) 1、认识首饰制作的基本设备 1)工作台 2)吊机(包括各种工具头、砂纸等) 3)抛光机(抛光布轮、抛光蜡) 4)超声波清洗机 5)压延机 6)批花机 7)滚桶抛光机8)喷砂机 2、认识常用首饰制作工具 1)焊枪(包括焊枪、风球、油壶、连接胶管) 2)焊台(耐火砖) 3)锤子:铁锤、胶锤4)砧铁 5)台钳6)戒指铁(戒指棒) 7)钳子:尖嘴钳、水口钳等8)锉刀 9)錾子 10)木夹 11)手柄 12)锯弓(包括线锯) 13)镊子、八字夹 14)铁剪 15)钢尺 3、观察首饰加工材料 1)砂纸2)抛光蜡 3)亚金4)铜板 5)焊料6)硼砂:助熔剂 7)稀酸:清洗氧化物、焊剂、油膏。(1:10)8)丙酮:清洗油渍和脏污 9)浮石粉:洗刷工件残留物 10)苏打:清洗残酸 实验二、首饰制作的锯功和锉功 一、实验目的: 1、掌握锯的操作方法。 2、掌握锉的操作方法。 二、实验要求: 1、掌握锯的操作方法。 2、掌握锉的操作方法。 三、实验内容:(以下内容手写,可适当删减) 1 准备铜片 1)将大铜片剪成30×30毫米的小铜片2块,在砧铁上用打锤将铜片轻轻打平,并用平锉将铜片四边锉平。 2)用两头索上的钢针在两块铜片上(一块作阳模,一块作阴模)各画出边长为20毫米的正方形一个。 3)用吊机在阳模,阴模的相应开锯点钻孔。注意阴模的开锯点在放样线的内侧,阳模的开锯点在放样线的外侧。 2 安装锯条 4)根据锯条的长度调整锯弓的长度,并旋紧固定螺丝。 5)把锯条的一端固定在锯弓的顶部并旋紧,保证锯齿向外,并向锯柄一端倾斜。将锯弓的头部顶在锉板的中央,用肩部向前挤压锯弓,同时将锯条的令一端固定在锯弓上。安装好的锯条紧实并有弹性。 3 锯切 5)沿阳模线的外侧和阴模线的内侧进行锯切。 6)金属片平置于锉板上。用左手拇指在金属片上开锯位置抵住锯条。第一锯,锯子倾斜,有利于顺利开锯。 7)锯子垂直,沿线条平滑锯割。锯切到直角顶端,继续上下拉动锯条,但不向前行进,同时慢慢转动锯条。锯条转正,沿另一条划线锯切。 4 锉修 8)锯好阳模和阴模后,先锉阴模直至尺寸到位;再锉阳模,在锉修过程中反复与阴模比较,直至与阴模紧密吻合,没有明显得缝隙。 实验三、金属的冷作及退火 一、实验目的: 1、认识金属的冷作硬化。 2、练习焊枪的使用。 3、掌握金属的退火处理。 二、实验要求: 1、认识金属的冷作硬化。 2、掌握金属的退火处理。 三、实验内容:(以下内容手写,可适当删减) 1、金属的冷作硬化 1)取80×20毫米铜片一块,放在焊接板上,用焊枪加热至彻底变黑。 2)用镊子夹起铜片放入冷水中,观察黑色氧化物慢慢脱落。 3)用镊子从水中夹起铜片放入稀酸中浸泡几分钟,再用镊子夹起铜片在清水中漂洗。 4)用手指弯曲铜片,具有很好的延展性。 5)把铜片放在砧铁上,用圆头锤敲打整张金属片。 6)再用手指弯曲铜片,金属变硬。 2、金属的退火处理 1)硼砂用水调成糊状,然后稀释。 2)用毛刷蘸取硼砂液,均匀涂抹于上述铜片的两面。 3)把铜片放在焊接板上,用柔和的蓝色大火从一端开始加热,直到颜色变红后上移火焰,使整片金属完成退火。 4)冷却到看不见红色,浸入水中,然后用稀酸浸泡几分钟,去除硼砂。 5)再用手指弯曲铜片,金属变软。 实验四、首饰制作的焊接操作 一、实验目的: 1、掌握焊接工具的使用方法。 2、掌握焊接技艺。 二、实验要求: 1、掌握焊接工具的使用方法。 2、掌握焊接技艺。 三 、实验内容:(以下内容手写,可适当删减) 1、检查油壶中的油是否合适(控制在油壶高度的三分之一左右),油管的接头是否严密,轻踩皮老虎是否漏气。 2、量好长度,30mm长2段,20mm长2段,用锯将铜丝逐段锯下。 3、将铜丝的锯口逐个锉成45°斜面,保证锯口两端面接触紧密,没有缝隙。 4、将锉修完的铜丝锯口对好,在焊瓦上用八字夹夹紧,用散火吹热,在锯口处点上少许硼砂水,再集中火烧至红热,点上焊料,任其自然融化,渗入并填满锯口。 5、将焊口处的突出物锉修光滑,保证与未焊位置粗细相等,过渡圆滑。 6、退火 7、用打锤轻轻击打矩形框的两个侧面,使侧面尽量平整。 8、用稀酸进行酸洗。 9、用锉刀和砂纸锉修、打磨焊接点及不光滑处,直至平滑光亮。 实验五、光身戒的制作 一、实验目的: 1、进一步了解首饰手工制作的基本流程, 2、熟练掌握锯、挫、焊在首饰制作中的应用。 二、实验要求: 1、进一步了解首饰手工制作的基本流程, 2、熟练掌握锯、挫、焊在首饰制作中的应用。 3、制作一个光身戒。 三、实验内容:(以下内容手写,可适当删减) 1)用指圈(戒指铁)量取所需指环尺寸。 2)按照量取的长度、合适的宽度在铜板上放样。用剪钳剪下,锤打并锉修,使其表面光滑。 3)退火处理金属条。 4)用半圆-平头钳夹住金属条一端,用力向钳子半圆一侧弯曲成U形。将金属条另一端也弯成U形,并使两端相对。使金属条两端对齐,用力使其重叠,然后拉回原位,使两端紧密贴合 5)硼砂用水调成糊状,涂在接缝的内侧和外侧。用镊子夹一小片焊料,蘸取硼砂,放在焊板上。将指环侧放在焊板上,焊接处面对自己,焊接口正中放在焊料上。 6)用焊枪缓慢加热整个指环,焊剂开始熔化起泡,然后加大火力,使金属变成深红色,焊料沿缝隙流动,成亮白色线状。 7)焊好的戒指趁热放入稀酸中炸洗,保持三分钟后,用清水洗净。 8)指环套在戒指铁上,用胶锤敲打成圆形。 9)先用锉刀锉修戒指两端面和内外圈,然后用1200#砂纸反复打磨,直至戒指内外表面光滑无痕。 10)根据个人喜好,用锉花,焊花,钻孔和锯纹等方法对戒指增加花色。 11)抛光。 (在实验六中进行此操作) 12)清洗。 (在实验六中进行此操作) 一、实验目的及要求: 本实例是要创建边框为1像素的表格。 二、仪器用具 1、生均一台多媒体电脑,组建内部局域网,并且接入国际互联网。 2、安装windows xp操作系统;建立iis服务器环境,支持asp。 3、安装网页三剑客(dreamweaver mx;flash mx;fireworks mx)等网页设计软件; 4、安装acdsee、photoshop等图形处理与制作软件; 5、其他一些动画与图形处理或制作软件。 三、实验原理 创建边框为1像素的表格。 四、实验方法与步骤 1) 在文档中,单击表格“”按钮,在对话框中将“单元格间距”设置为“1”。 2) 选中插入的表格,将“背景颜色”设置为“黑色”(#0000000)。 3) 在表格中选中所有的单元格,在“属性”面版中将“背景颜色”设置为“白色”(#ffffff)。 4) 设置完毕,保存页面,按下“f12”键预览。 五、实验结果 六、讨论与结论 本实验主要通过整个表格和单元格颜色的差异来衬托出实验效果,间距的作用主要在于表现这种颜色差异。表格的背景颜色和单元格的背景颜色容易混淆,在实验中要认真判断,一旦操作错误则得不到实验的效果。“表格宽度”文本框右侧的表格的宽度单位,包括“像素”和“百分比”两种,容易混淆,要充分地理解这两种单位表示的意义才能正确地进行选择,否则就不能达到自己想要的效果,设置错误就会严重影响实验效果。 一、 实验目的 1、 掌握气垫导轨阻尼常数的测量方法,测量气垫导轨的阻尼常数; 2、 学习消除系统误差的试验方法; 3、 通过实验过程及结果分析影响阻尼常数的因数,掌握阻尼常数的物理意义。 二、 实验仪器 气垫导轨、滑块2个、挡光片、光电门一对、数字毫秒计数器、垫块、物理天平、游标卡尺. 三、 实验原理 1、含倾角误差 如图3,质量为m的滑块在倾角为?的气垫导轨上滑动。由气体的摩擦理论可知,滑块会受到空气对它的阻力,当速度不太大时,该力正比于速度v,即f?bv。滑块的受力示意图如图所示,据牛顿第二定律有ma?mgsinbv (1) 设滑块经过k1和k2时的速度分别为v1和v2,经历的时间为t1,k1、k2之间的距离为s. 由以上关系易得v2?v1?gt1sin 即: b? bs m m(v1?v2?gt1sin?) s (2) (sin?= hl ) (3) 图1 2、不含倾角误差 为了消除b中的倾角?,可再增加一个同样的方程,即让滑块在从k2返回到k1,对应的速度分别 为v3和v4,经过时间t2返回过程受力图如图2 图2 bv? 同样由牛顿二定律有: mgsin m a (4) 由始末条件 可解得: v4?v3?gt2sin由(2)式和(5)式可得: b? bsm (5) (6) m[t1(v3?v4)?t(2v?v)]1 2 s(t1?t2) 四、 实验步骤 1、打开电源,用抹布擦净气垫导轨,并连接好光电门与数字毫秒计数器; 2、调节水平。将一滑块在导轨上由静止释放,若滑块任静止,则导轨水平,否则则要调节调平螺母,使其水平; 3、调平后,选择一厚为h的垫块将导轨一端垫起,将两光电门固定在导轨上相距为s处,并选择数字毫秒计数器的记速功能; 4、将质量为m1的滑块从k1上方的某一位置释放,记下滑块次经过个光电门的速度v1、v2、v3、v4; 5、将数字毫秒计数器选择为计时功能,将质量为m1的滑块从4中的同一高度释放,使其下滑在反弹回来,并记下计时器的读数t1、t2:; 6、换另一质量为m2的滑块,重复步骤4、5; 7、用游标卡尺测出点快的高度h,用物理天平测两滑块的质量m1和m2。 五、 实验数据记录及处理 滑块一: m=241.59g h=1.445cm l=114cm s=50cm 代入公式(3)和(6)得:b1?7.25?10?3(N?s)/m b'1?7.68?10?3(N?s)/m 滑块二:m=186.36g h=1.445cm l=114cm s=50cm 代入公式(3)和(6)得:b 2 ?3.49?10 ?3 (N?s)/m b'2?4.35?10?3(N?s)/m 六、 相对误差及分析 两种测量方法产生的相对误差为: ?1? b1?b1 b '1 ' ?100%?5.59% ?2? b2?b2 b2 ' ' ?100%?19.77% 含倾角时由于?很难测而且不易测准,所以会产生较大的相对误差,采用复测法测得的值相对较精确。 七、 实验分析讨论 1、实验前一定要将导轨调至水平状态,且确保导轨处于干净通气状态,对同一个滑块要保证每次释放时在同一高度; 2、滑块在导轨上运动时,虽然没有滑动摩擦阻力,但要受到粘性内摩擦阻力的作用,从而对滑块的运动产生一定的影响,造成附加的速度损失,从而影响实验结果。 3、复侧法可以通过解方程消去难测量?,从而减少了系统误差。本实验采用的是在一次下滑中记录4次速度,这样可能会因后面的速度太小而影响实验的精确度,所以也可以采用两次取不同的s下滑,建立方程消去?。 一、实验目的 1、了解CA6140车床的总体布局以及主要技术性能指标。 2、了解CA6140车床的传动路线,理解传动过程中的变速原理。 3、了解主轴箱、进给箱、溜板箱等主要箱体不见的内部结构,理解其中操纵机构的工作原理。 4、了解CA6140车床上卡盘、刀架、尾座、挂轮架、丝杠和光杆等主要零部件的构造和功能,理解其工作原理。 二、实验设备及仪器 CA6140车床、三爪卡盘、卡盘扳手、刀架扳手、尾座扳手、内六角扳手、活动扳手、卷尺。 三、实验原理和方法 通过现场教学与实验相结合的方式让学生通过对CA6140车床的解剖、观察和分析,提高对机床的感性认识,加深对课堂所学理论知识的理解。重点认识和了解以下六个方面的内容。 1、CA6140普通车床的布局 CA6140是一种中等精度的卧式车床,适合加工各种回转表面的轴类、筒类和盘类零件,也可以加工各种常用的公制螺纹、英制螺纹、模数螺纹和径节螺纹。CA6140 车床的加工精度适中,加工范围宽,通用性强,是一种最常用的机械加工设备。CA6140车床的结构布局参见教材,学生可以通过与实物对照,来熟悉CA6140车床各部件的名称,了解各部件的功能及布局。 2、CA6140普通车床的主要技术性能指标 在本实验中,通过对车床进行实际测量或演示,了解车床的下述技术性能指标。 (1)床身上最大工件回转直径 (2)刀架上最大工件回转直径 (3)最大工件长度 (4)最大车削长度 (5)主轴内孔直径 (6)主轴正转与反转的级数及范围 (7)纵向与横向进给量的级数及范围 (8)车削螺纹的种类及范围 3、CA6140普通车床的主轴箱 主轴箱是车床中最重要的一个箱体部件,工作时工件的旋转运动和车刀的自动纵、横进给运动都要通过主轴箱传递。了解车床的工作原理,首先应从了解主轴箱的工作原理开始。对主轴箱的认识应着重从以下几个方面进行观察和了解。 1) 卸荷式带轮 2) 双向片式摩擦离合器 3) 变速操纵机构 4) 主轴运动的传动路线 5) 主轴箱内的润滑 4.CA6140普通车床的进给箱 进给箱是调节自动进给速度和改变进给方向的专门部件。主轴转速确定之后,在选择与主轴转速相适配的自动进给速度和进给方向时,可通过调整进给箱的操纵机构来实现。对进给箱的认识,应着重了解进给箱传动路线和操纵机构的工作原理。进给箱里有三套操纵机构,它们分别是:基本组的操纵机构、增倍组的操纵机构、螺纹种类变换操纵机构及丝杠、光杠传动转换的操纵机构。 5、CA6140普通车床的溜板箱 溜板箱的主要功能是将光杆或丝杠的旋转运动转换为直线进给运动,并带动溜板和刀架实现纵向或横向快速移动,用于非加工状态下快速调整车刀位置。 溜板箱内有纵向或横向机动进给操纵机构、换向机构、丝杠开合螺母机构、过载保护机构等。 对溜板箱的认识应重点观察和了解以下几个方面。 (1)丝杠开合螺母机构。 (2)纵向、横向机动进给操纵机构。 (3)快速移动操纵机构。 (4)互锁机构。 (5)安全离合器。 6.CA6140普通车床的卡盘、刀架、尾座、挂轮架、丝杠和光杠 CA6140普通车床的卡盘、刀架、尾座、挂轮架、丝杠和光杠是暴露在车床外边的部件可以直接观察到。在观察卡盘、刀架、尾座、挂轮架的结构时可以适当拆卸上面的零件,以便更清楚地了解其工作原理。 四、实验任务 1、观察CA6140车床整体结构,熟悉其各部件的名称,了解各部件的功能。 2、了解CA6140车床的主要技术性能指标及实现原理。 3、观察主轴箱双向片式摩擦离合器、齿形离合器和制动器的结构形式和工作原理。 4、对照结构图辨别主轴箱内每根传动轴的轴号,观察它们的传动顺序。 5、观察变速机构的工作原理,了解滑动齿轮的作用和操纵机构的工作原理。 6、分别观察主轴高速正转、低速正转和反转时的传动路线,记录传动时经过的轴、齿轮,并分别计算传动比。 7、观察进给箱内部结构,了解进给箱的传动路线及操纵机构的工作原理。 8、观察溜板箱内部结构,了解光杠、丝杠的运动传递原理,纵向进给和横向进给的工作原理,以及刀架快速移动机构的工作原理。 五、实验步骤 1、观察CA6140车床整体布局,熟悉各部件的名称,了解各部件的功能。 2、用卷尺测量CA6140车床的结构尺寸,了解其尺寸性能指标。开机演示,了解其运动性能指标。 3、打开主轴箱上盖,观察箱体内的双向片式摩擦离合器、齿形离合器和制动器的结构, 分析操纵机构的工作原理。 4、认真观察主轴箱内传动轴和传动齿轮的传动顺序,记录传动链的有关数据。 5、打开进给箱前盖,观察箱体内传动轴和传动齿轮的传动顺序,观察操纵机构的原理。 6、观察溜板箱内部结构,了解纵向进给和横向进给的工作原理,分析刀架快速移动机构的工作原理,了解溜板箱与纵向溜板的连接形式。 7、观察卡盘、刀架、尾座、挂轮架、丝杠和光杠的结构。 8、将车床按原状重新装好。 9、计算已记录的主轴箱中传动链的传动比。 10、填写实验报告。 六、注意事项 1、拆开车床时,如果车床带电应先切断总电源,并挂“严禁送电”的警示标志。 2、拆、装车床的零件时应在老师的指导下进行,注意安全,以免身体受伤。 3、对车床的零件应轻拿轻放,以免零件受损。 4、不要让任何物品掉进车床的箱体内。 七、思考题 1、变换车床主轴的正、反转向时,靠哪些零件或部件来实现 2、主轴箱里参与调整主轴转速的滑移齿轮有多少个靠它们可改变多少种正转转速多少种反转转速 3、说明主轴箱中使用的斜齿轮在传递运动时的优点。 4、从主轴箱到进给箱的运动是由哪些零件传递的? 5、说明光杠与丝杠在使用上的区别。 VC++实验报告 班号:0904101 学号:090410123 姓名:仲维祎 实验一VC++开发环境的熟悉和C++基础知识实验 一、实验目的 1. 掌握C++语言的特点。 2. 掌握C++的各种数据类型及基本运算。 3. 掌握C++各种控制结构及使用技巧。 4. 掌握C++的函数、数组、指针的相关概念和使用方法。 5. 灵活运用C++相关基础知识进行综合程序设计。 6. 回顾面向过程程序设计方法。 7. 熟悉Visual C++的开发环境 8.掌握用应用程序向导创建一个控制台应用项目的方法。 9.掌握源代码文件的新建、打开、保存和关闭等基本操作。 10.掌握Visual C++项目的编译、连接和执行。 11.掌握代码简单语法错误修正和调试的一般过程。 二、实验知识点概念 注意C++中同C的不同之处,包括数据类型,输入输出等相关的差异。 三、实验题目 1. 采用插入排序法,输入10个整数按升序排序后输出。要求编写一个通用的插入排序函数,它带有三个参数,第一个参数是含有n个元素的数组,这n个元素已按升序排序;第二个参数给出当前数组中元素个数;第三个参数是要插入的整数。该函数的功能是将一个整数插入到数组中,然后进行排序。另外还需要一个用于输出数组元素的函数,要求每一行输出5个元素。 2. 有5个学生,每个学生的数据结构包括学号、姓名、年龄、C++成绩,数学成绩和英语成绩、总平均分,从键盘输入5个学生的学号、姓名、3门课的成绩,计算3门课的总平均分,最后将5个学生的数据输出。要求各个功能用函数实现。 3. 对程序加入断点简单调试。 四、程序思路 五、程序源代码 1:代码如下 #include using namespace std; void (char iArray,int nCount,int nNumber) { int i=nCount-1,j=0; char *iArray2; iArray2=iArray; *(iArray2+nCount)=nNumber;//多分配一个空间给传入数据 for(i;i>=0;i--) { if(nCount==1) *iArray=nNumber; if (*(iArray2+i)<*(iArray+i+1)) { j=*(iArray2+i); iArray2[i]=iArray2[i+1]; iArray2[i+1]=j; } } cout<<"the array is ";血凝抑制实验报告 篇4
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